探索MicroRNA 需要用到的主要试剂和方法

利用MicroRNA基因芯片技术，探讨MicroRNA在外阴鳞状细胞癌组织中的表达情况及其临床意，需要用到哪些试剂仪器设备呢？具体采用什么样的方法呢？

主要试剂及仪器

1. RNA抽提剂
2. nanodrop分光光度计
3. 凝胶电泳
4. 标记试剂盒
5. 芯片
6. GenePix4000B芯片扫描仪

实验 测试方法

• RNA抽提

使用RNA抽提剂TRIzol(Invitrogen)和miRNeasyminikit(QIAGEN)进行样品RNA抽提，有效地恢复所有RNA物种，包括miRNAs.使用nanodrop超微量分光光度计进行RNA的质量检测，用凝胶电泳检测RNA的纯度及完整性。

• RNA标记

RNA分离以后，采用miRCURYl”ArrayPower标记试剂盒，用标记酶将Hy3例或Hy5埘荧光基团标记miRNA。

• 芯片杂交

标记完成后，将标记好的探针和miRCURYTM芯片(由Exqion公司提供的第六代miRCURp芯片，包括多达1891个探针，涵盖所有miRBasel6.0收录的人类、大鼠、小鼠的miRNA，除此之外，该芯片还包含了miRBasel6.0没有记载的66个miRNA)杂交，使用GenePix4000B芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度。